P2级生物安全实验室管理操作手册

   说明：P2实验室是用于初步的生物安全实验，国标明确了相应要求,适用于对人和环境有中等潜在危害的
微生物.P2 实验室主要用于初级卫生服务、诊断和研究，其实验对象的危害等级为Ⅱ级（中等个体危害，
有限群体危害），具体定义为“能引起人类或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境
不会引起严重危害的病源体，代表病原体：流感病毒。其操作必须严格控制管理制度执行，以确保实验
室的安全。

P2实验室操作规程
1. 目的
加强P2实验室生物安全管理，规范实验人员仪器设备、实验操作行为，确保P2实验室工作安全运行。
2．适用范围
   适用于P2实验室的管理与操作。
3．职责
3．1实验人员：严格执行P2实验室相关管理规定，规范操作行为。
3．2实验室负责人：监督执行P2实验室相关管理规定，及时纠正违规操作行为，发现不安全隐患及时上报。
3．3科室负责人：监督并定期抽查P2实验室管理规定执行情况，及时发现并解决P2实验室运行中出现的问题。
4．准入要求
4．1  只有经过授权的人员才允许进入P2实验室工作区。
4．2  16岁以下儿童禁止进入P2实验室工作区。
4．3  实验人员要接受相应预防性生物制品的免疫接种。
4．4 禁止将无关动物带入实验区。
4．5 外单位人员来访、参观、进修，必须经中心主管部门批准，未经批准不得进入P2实验室工作区。
4．6 外来人员进入P2实验室，须由本室人员陪同，在严格遵守有关规定的条件下方可进入，同时填写
《外来人员进出实验室特殊区域登记表》。
4．7 限制免疫耐受者进入实验室。
4．8 限制正在接受免疫抑制剂者进入实验室。
4．9 严禁在实验室内吸烟、饮食、化妆等。
 
5．进入程序
5．1进入P2实验室，伸手打开缓冲间内空调和生物安全柜按钮，使实验室和生物安全柜净化10分钟以上。
方可进入实验室进行实验。。
5．2将实验所需材料和物品放入生物安全柜中。
5．3进入P2实验室缓冲区，关闭外门，在工作服外加穿P2实验室专用罩衣（紧口，后系带），戴一次性
口罩、帽子和戴两层手套, 换穿P2实验室专用鞋。需要时打开照明按钮。
5．4进入实验室工作区，首先打开照明按钮，打开前玻璃门，调节到要求的高度。将实验所需物品一次
性放入实验台内，摆放要有秩序且要相对区分清洁物与污染物，净化生物生物安全柜10分钟左右。
5．5观察实验区负压表指示数值是否在工作要求范围内，如不能满足要求则进行负压调节。观察温湿度
计，填写温湿度计使用记录。
5．6实验人员手臂放进生物安全柜内大约1分钟后，即可按无菌要求进行实验操作。
5．7完成整个实验操作后，将使用过的物品进行分类处理。消毒整个工作台面，再让排风至少运行10分
钟。
5．8放下前玻璃门，打开生物生物安全柜紫外线灯进行毒。
5．9离开实验操作区前脱去第二层手套放到指定容器内消毒处理。
5．10 填写仪器使用记录。
6．实验后物品、污染物处理
6．1对不可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。然后按医用垃
圾交中心统一处理。
6．2对可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。之后转入洗刷间
进行洗刷。
6．3对一次性实验用品放入容器内高压灭菌，然后按医用垃圾交中心统一处理。
6．4对不可高压灭菌处理的物品，应选择适当的消毒剂进行浸泡消毒。可回收的物品，送洗刷室；不可
回收的物品，按中心“三废”处理的有关规定执行。
7．出实验室程序
7．1打开实验室内门，出来后随手关闭。将实验室专用罩衣脱下，挂在缓冲区，待稍后进行紫外线消毒。
脱掉一次性帽子、口罩和手套，放入待消毒的垃圾筒内，按门锁按钮，打开外门，更换拖鞋，打开紫外
线按钮，同时关闭排风按钮，然后关闭外门。注：若进入时打开照明，则此时应关闭。
7．2如实验过程中在传递窗传递过污染性物品，在实验后应进行紫外线消毒。
7．3待消毒完毕后（至少30分钟），关闭生物安全柜和紫外线按钮。
8．注意事项
8.1 应保持实验室环境清洁。
8.2 工作台内部空间需用消毒剂擦洗，如消毒剂具有腐蚀性，要用自来水清洗台面，以避免腐蚀。
8.3 操作台内的实验器具应避免阻挡前后的穿孔网格，并且避免把东西卷入其中。所有的操作应该在距
离前面的格栅约10厘米以内的工作面上进行。
8.4 操作时应动作缓慢，减少不必要的手和手臂伸进和伸出空气屏障，以免影响气流。
8.5 工作台在操作时，应尽量减少实验室内开门、关门，人员走动等情况，以免影响室内气流。
8.6 通常情况下，在生物安全柜里面不要使用酒精灯或类似的明火，因为他们会破坏气流模式、损坏
HEPA过滤器，并且有火灾的危险（除非有特殊的要求）。
8.7 警报灯或警铃响时切勿继续操作。
8.8 一旦工作台在操作时出现意外事故，须在这些东西搬出之前，连同工作台在内进行全面消毒，如果
溢出的污水或液体集中在排液槽中，必须采取紧急措施将污水排出。同时填写《实验室潜在危险材料
溢出或浅出记录》。
8．9试验结束后将试验物品移出生物安全柜，不得将生物安全柜当成储物箱。
9． 维护保养
9.1 当生物安全柜移动后或实验室布局改动时，应该由有经验的工作人员对生物安全柜的屏障作用重新
进行测试。
9.2 半年一次生物安全柜内沉降菌检测：生物安全柜消毒清洁后，紫外线照射30分钟，开前门通风十分
钟后，于工作台面中部均匀放置两块已制好、经检验无菌的普通营养琼脂培养皿，打开培养皿盖，使
培养基表面暴露30分钟，再将培养皿盖盖上后倒置，取出放36℃培养箱培养24小时以上，用肉眼直接
进行菌落计数，以≤1为合格。
9.3 检查前玻璃驱动装置的松紧度。
9.4每年请厂商对生物安全柜进行风速、洁净度检测一次。
9.5 根据需要更换紫外灯管和照明灯管。杀菌灯工作超过一定时间后会失去效果，当工作台灯照强度
低于每平方厘米40微瓦时，就应更换新的杀菌灯。（可用紫外线灯表来测定工作台表面的灯照强度）
9.6 应根据需要更换高效过滤器（HEPA），由专业人员进行操作。（高效空气过滤器的寿命取决于
如何使用它。在实验室的正常条件下，可以预测本过滤器至少可以使用五年。）
9.7 在开始工作之前要让生物安全柜的风机至少运行3-5分钟使生物安全柜内的空气进行净化。
9.8 定期对生物安全柜的工作台面、内壁（不包括送风滤器扩散板）和观察窗的内表面用消毒剂
（75%酒精或1g/L有效氯）擦拭。再用无菌蒸馏水进行擦拭以清除残余的消毒剂。
9.9 注意避免物品或液体进入格栅下面。经常用柔性的清洁剂或玻璃专用清洁剂清洗箱体外表面
和玻璃。
9.10 每月消毒一次工作台下面的托盘。


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