无菌实验室日常管理要求

　　为维护无菌实验室的洁净度不受影响，无菌实验室应制定质量管理标准，并设专人负责无菌间的定期环境监测工作相关要求大至如下：

　　1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。

　　2.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。

　　3.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作人员进入无菌室应关掉紫外灯；

　　4.人员进入无菌室要穿无菌衣、帽、口罩和专用鞋，非工作人员不得随意进入；

　　5.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液等。

　　6.无菌室内配备紫外灯进行空气消毒，应定期用适宜的消毒液（70%酒精或0.2%新洁尔灭）灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。

　　7.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。每日进行湿式小扫除，每周进行大扫除，每月进行空气和实验台表面的细菌学检测，各项指标控制在最低标准，符合无菌室的技术要求。

　　8.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。

　　9.需要带入无菌室使用的仪器、器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应用适宜的方法灭菌。

　　10.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉消毒外表面。

　　11.无菌间内应保持清洁。操作完毕，应及时清理无菌室，用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。再用紫外灯辐照灭菌。需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。

　　12.处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。

　　13.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～36℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～36℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。